WEKO3
アイテム
真核微生物からのアミロイドβ凝集阻害活性の高い抽出物のスクリ ーニングと抽出物による細胞外アミロイドβ凝集の減少
http://hdl.handle.net/10258/0002000346
http://hdl.handle.net/10258/000200034636e916c3-eb38-438d-8fe3-0eadc6e2542d
| 名前 / ファイル | ライセンス | アクション |
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A550.pdf (3.8 MB)
Download is available from 2026/3/1.
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A550_summary.pdf (134 KB)
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| Item type | 学位論文 / Thesis or Dissertation(1) | |||||||||
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| 公開日 | 2025-06-12 | |||||||||
| エンバーゴ | ||||||||||
| 日付 | 2026-03-01 | |||||||||
| 日付タイプ | Available | |||||||||
| タイトル | ||||||||||
| タイトル | Screening of an extract with higher amyloid β aggregation inhibitory activity from eukaryotic microorganisms and the reduction of extracellular amyloid β aggregation by the extract | |||||||||
| 言語 | en | |||||||||
| タイトル | ||||||||||
| タイトル | 真核微生物からのアミロイドβ凝集阻害活性の高い抽出物のスクリ ーニングと抽出物による細胞外アミロイドβ凝集の減少 | |||||||||
| 言語 | ja | |||||||||
| 言語 | ||||||||||
| 言語 | eng | |||||||||
| 資源タイプ | ||||||||||
| 資源タイプ識別子 | http://purl.org/coar/resource_type/c_db06 | |||||||||
| 資源タイプ | doctoral thesis | |||||||||
| アクセス権 | ||||||||||
| アクセス権 | embargoed access | |||||||||
| アクセス権URI | http://purl.org/coar/access_right/c_f1cf | |||||||||
| 著者 |
Gegentuya
× Gegentuya
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| 抄録 | ||||||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||||||
| 内容記述 | アルツハイマー病（AD）は、進行性の認知機能障害や行動障害を特徴とする中枢神経系の 変性疾患である。AD は認知症患者の60〜70%を占める最も一般的な認知症のタイプである。 AD の主な病理学的特徴は、脳内にアミロイドβ（Aβ）を含む細胞外プラークが蓄積するこ とである。Aβ を標的とした免疫療法薬には大きな進展が見られており、米国食品医薬品局 （FDA）はLeqembi™（レカネマブ）およびKisunla™（ドナネマブ）を承認した。これらの薬 は臨床応用で一定の成果を上げているものの、AD を完全に治癒することは依然として困難 であり、さまざまな副作用を伴う。 近年、世界中の研究者たちによりAβ 凝集阻害剤のスクリーニングが著しく進展し、天然 抽出物が強力なAβ 凝集阻害活性を示すケースが増えている。そのため、これらの天然抽出 物を日常の食事に取り入れることは、AD の予防に向けた安全な手段を提供する可能性があ る。 本研究では、強力なAβ 凝集阻害剤をスクリーニングするために、200 種類以上のキノコ 類からなるライブラリを選んだ。キノコエキスをスクリーニングするために、量子ドットイ メージングを用いた自動化微量ハイスループットスクリーニング（MSHTS）システムを使用 した。210 種類のキノコ抽出物のうち、11 種類がAβ 凝集阻害活性を示した。その中で、コ フキサルノコシカケとカバノアナタケがより優れた阻害活性を示した。 次に、MSHTS 結果に基づいて、コフキサルノコシカケのメタノール抽出物の分画を行った。 最初に、極性および非極性溶媒を用いてメタノール抽出物を分画した。エーテルおよび酢酸 エチル画分がAβ 凝集阻害活性を示した。酢酸エチル画分はシリカゲルカラムクロマトグ ラフィーを用いてさらに分画され、MSHTS アッセイにより評価した。最終的に、EC50 が2.30 ± 0.859 μg/ml の阻害活性を有する活性画分を得ることができた。しかし、さらなる分画 に伴い活性が低下したため、未解明の複数の化合物による相乗効果があるのかもしれない。 将来、この阻害活性のメカニズムを解明したいと考えている。 また、MSHTS システムを使用していくつかの変形菌類のAβ 凝集阻害活性を評価したとこ ろ、モジホコリが高い活性を示した。さらに、50 種類のカビ類のAβ 凝集阻害活性を評価 し、そのうち18 種類が活性を示した。 全体として、本研究は、真核微生物がAD 予防において潜在的な価値を持つことを示唆して いる。MSHTS システムはハイスループットスクリーニングにおいてその可能性を示し、キノ コ類、変形菌類、カビ類からの潜在的な活性化合物の評価を可能にした。真核微生物をAD 研究に取り入れることで、革新的な治療法や機能性食品の探索に新たな道が開かれ、神経変 性疾患が引き起こす課題の解決に役立つ可能性がある |
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| 言語 | ja | |||||||||
| 抄録 | ||||||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||||||
| 内容記述 | Alzheimer’s disease (AD) is a degenerative disease of the central nervous system characterized by progressive cognitive dysfunction and behavioral disorders. AD is the most common type of dementia, accounting for 60–70% of dementia cases. The main pathological feature of AD is the accumulation of extracellular plaques containing amyloid β (Aβ) in the brain. Significant progress has been made in immunotherapeutic drugs targeting Aβ. The U.S. Food and Drug Administration (FDA) has approved Leqembi™ (lecanemab-irmb) and Kisunla™ (donanemab-azbt). Although these drugs have achieved certain results in clinical applications, they are still unable to effectively cure AD and are associated with various side effects. In recent years, significant progress has been made by researchers worldwide in screening for Aβ aggregation inhibitors, with natural extracts showing increasingly potent Aβ aggregation inhibitory activity. Therefore, incorporating these natural extracts into daily diets may offer a safe approach for the prevention of AD. In this study, I chose a library of mushrooms (over 200) to screen potent Aβ aggregation inhibitors. To screen mushroom extracts, I used quantum dot imaging based automated microliter-scale high throughput screening (MSHTS) system. Out of 210 mushroom extracts, 11 extracts showed Aβ aggregation inhibition. Among them Ganoderma applanatum and Fuscoporia obliqua showed better inhibition activity. I went ahead to perform MSHTS assay guided fractionation of methanol extract Ganoderma applanatum (200 grams). Initially, methanol extract was fractionated using polar and non-polar solvents. Ether and ethyl acetate fractions displayed Aβ aggregation inhibitory activity. The ethyl acetate fraction was subjected to sub fractionation using silica gel column chromatography followed by MSHTS assay. Finally, I was able to get active fraction with inhibitory activity and EC50 is 2.30 ± 0.859 μg/ml. However, the activity decreased with further purification, so there may be a synergistic effect of multiple compounds that has not yet been elucidated. In future, I would like to elucidate the mechanism behind its inhibitory activity. I also evaluated the Aβ aggregation inhibitory activity of some myxomycetes using the MSHTS system, among which Physarum showed high activity. Furthermore, I evaluated the Aβ aggregation inhibitory activities of 50 molds, of which 18 showed activities. Overall, this study indicates that eukaryotic microorganisms hold potential value in the prevention of AD. The MSHTS system demonstrated its prospects in highthroughput screening, enabling the evaluation of potential active compounds from mushrooms, myxomycetes, and molds. Incorporating eukaryotic microorganisms into AD research opens new avenues for exploring innovative therapies and functional foods, which may help address the challenges posed by neurodegenerative diseases. |
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| 言語 | en | |||||||||
| 学位授与機関 | ||||||||||
| 学位授与機関識別子Scheme | kakenhi | |||||||||
| 学位授与機関識別子 | 10103 | |||||||||
| 言語 | ja | |||||||||
| 学位授与機関名 | 室蘭工業大学 | |||||||||
| 言語 | en | |||||||||
| 学位授与機関名 | Muroran Institute of Technology | |||||||||
| 学位名 | ||||||||||
| 言語 | ja | |||||||||
| 学位名 | 博士（工学） | |||||||||
| 学位の種別 | ||||||||||
| 言語 | ja | |||||||||
| 値 | 課程博士 | |||||||||
| 学位授与番号 | ||||||||||
| 学位授与番号 | 甲第550号 | |||||||||
| 報告番号 | ||||||||||
| 言語 | ja | |||||||||
| 値 | 甲第550号 | |||||||||
| 学位記番号 | ||||||||||
| 言語 | ja | |||||||||
| 値 | 博甲第550号 | |||||||||
| 研究科・専攻 | ||||||||||
| 言語 | ja | |||||||||
| 値 | 工学研究科 | |||||||||
| 学位授与年月日 | ||||||||||
| 学位授与年月日 | 2025-03-24 | |||||||||
| 著者版フラグ | ||||||||||
| 出版タイプ | VoR | |||||||||
| 出版タイプResource | http://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85 | |||||||||
